苯基疏水色谱柱是苯基通过碳链连接键合于硅胶基质上的一种色谱柱。其中,连接的碳链以3个碳原子较常见,也有一些采用4个或者更多的碳链来键合。这种结构使得苯基疏水色谱柱具有一定的疏水保留能力,并且为芳香化合物提供了较佳的选择性。其主要通过固定相和溶质之间的电子间相互作用进行分离。这种相互作用除了疏水性相互作用外,还显示出不同于包含翱顿厂在内的烷基硅胶基质固定相的分离特性。特别是对于带有芳香环的化合物,苯环可以与芳香化合物之间形成&辫颈;-&辫颈;相互作用,从而提供了与颁18不同的选择性。
1、冲洗
每次使用完色谱柱后,要用适当的溶剂对色谱柱进行冲洗。可以先用强溶剂(如乙腈)冲洗,去除残留的样品组分,然后再用弱溶剂(如水)平衡色谱柱。冲洗的时间一般为15-30分钟,具体时间可以根据样品的性质和复杂程度来确定。
定期进行深度冲洗也是很有必要的。可以每隔一段时间(如一周或一个月)使用专门的色谱柱清洗液对色谱柱进行清洗,以去除色谱柱内部积累的杂质和污染物。清洗液的选择要根据色谱柱的类型和污染情况来确定,一般可以使用含有表面活性剂或螯合剂的溶液。
2、再生
当色谱柱的使用性能下降,如出现峰形变宽、保留时间改变或者分离度降低等情况时,可以考虑对色谱柱进行再生。再生的方法有多种,可以使用适当的化学试剂进行处理。
一种常见的再生方法是使用一定比例的有机溶剂和水的混合液对色谱柱进行反向冲洗。例如,可以使用90%乙腈和10%水的混合液从色谱柱出口到入口的方向进行冲洗,这样可以将吸附在固定相上的杂质洗脱下来。再生后,需要用大量的水和流动相重新平衡色谱柱,使其恢复到正常的工作状态。
3、长期保存
如果长时间不使用色谱柱,需要对其进行妥善的保存。首先,要将色谱柱从仪器上卸下,清洗干净后,用合适的溶剂(如甲醇或乙腈)充满色谱柱,以保持固定相的湿润状态。这是因为固定相在干燥的情况下可能会发生收缩或损坏。
然后将色谱柱两端密封好,放置在阴凉、干燥的地方保存。避免阳光直射和高温环境,防止固定相发生化学反应或变质。